儿童CVA与TIM-3基因多样性关联探讨

本文作者：吴立强、陈建平、何念海、桂芹、晏玲、陈盛 单位：第三军医大学西南医院儿科

TIM基因家族在哮喘等变态反应性疾病和自身免疫性疾病的发生、发展中起到至关重要的作用［10］。人类TIM基因家族在参与Th1/Th2细胞介导的免疫调节中起到关键作用［3］。TIM-3基因编码的蛋白质由78个氨基酸的胞质部分，21个氨基酸的跨膜部分和181个氨基酸的胞外区组成，并表达于活化Th1细胞表面、树突状细胞或恶性上皮组织［11］。TIM-3分子的启动子和编码区域均发现有SNP存在，并且这些SNP可能与机体对疾病的易感性或耐受性相关［12］。

人类TIM-3基因长约23kb，所编码的跨膜糖蛋白包含301个氨基酸。TIM-3是一类具有基序的Ⅰ型膜蛋白，其蛋白分子的细胞外区含有1个免疫球蛋白Ⅴ区，1个富含丝氨酸和苏氨酸残基的黏蛋白区，胞浆区具有6个酪氨酸，其中1个属于酪氨酸磷酸化基序部分。TIM-2，3蛋白的细胞外区具有4个N-连接位点和5个O-糖基化连接位点。TIM-3分子主要表达在终末期的Th1细胞表面，对Th1细胞起负性调控作用［13－14］。McIntire等［2］通过基因组DNA分析显示TIM-3多态性与Tapr(气道高反应性调节位点)完全分离，TIM-3基因在小鼠和人类的Th1细胞表面特异性表达，TIM-3基因多态性与哮喘，自身免疫性疾病相关。

本研究对重庆地区汉族人群进行TIM-3基因启动子区Rs1051746、Rs4704853、Rs10053538三个多态性位点的基因型检测，发现3个多态性位点在检测人群中均存在。TIM-3启动子区的Rs1051746与儿童咳嗽变异性哮喘易感性相关，携带T-C-G单体型的人群，OR值3．232，95%CI为1．066～9．796，罹患CVA的风险性较正常人群高，但携带T-C-G单体型在CVA人群中的比例较低，尚不能排除由于抽样误差及样本量太少的影响。CVA患儿各位点基因多态性与皮肤点刺、总IgE、EOS水平间的相关性分析未得出有统计学差异的结论，分析可能的原因是TIM-3启动子区Rs1051746、Rs4704853、Rs10053538基因多态性变异不影响皮肤点刺、总IgE、EOS水平，Rs1051746位点不是通过影响皮肤点刺、总IgE、EOS水平的途径来致病。Xu等［15］对TIM-3基因－1541C＞T，rs4704853(－882C＞T)，rs10515746(－574G＞T)和+4259G＞T4个位点的100多例病例对照研究发现，+4259G＞T位点的变异与宁夏回族人群类风湿性关节炎发生有关。王燕等［16］对新疆维吾尔族、汉族人群TIM-3基因启动子区rs10053538(－1516G/T)、rs6555849两个位点，外显子区的rs10515746(－574G＞T)、rs4704853(－882C＞T)位点及位于内含子区的rs13170556和rs6555849位点的单核苷酸多态性进行病例对照研究发现与过敏性鼻炎的易感性无关。Chae等［17］在韩国人群中研究发现TIM-3基因的+4259G/T多态性与哮喘无相关，但与过敏性鼻炎和类风湿关节炎相关;－574T/G多态性与哮喘、过敏性鼻炎和类风湿关节炎相关。Li等［18］在中国人群中研究发现TIM-3基因rs9313439和rs10515746位点基因多态性与系统性红斑狼疮无相关。张才成等［19］在中国湖北地区人群，对153例哮喘和130例健康者采用PCR-RFLP研究表明TIM-3基因启动子区－1541C/T位点多态性与哮喘无关，启动子区－574T/G多态性与哮喘相关，与韩国学者Chae等［17］研究一致。国内胡丽华等［20］研究再次证实湖北汉族儿童TIM-3启动子区存在多态性变异，其中－574T/G多态性可能与湖北汉族儿童哮喘易感性有关。随后，李际盛等［21］对山东汉族人群的研究也支持TIM-3基因启动子区－574T/G多态性与哮喘相关，还证实启动子区－882T/C多态性与哮喘相关，与本研究结果一致。以上研究结果表明人类TIM-3基因多态性与哮喘、变应性鼻炎、类风湿关节炎等变态反应性疾病的易感性有关。

虽然在本研究中发现TIM-3启动子区该3个位点的多态性纯合基因型在个体中不存在或者存在极低，这可能与长期的遗传学进化选择相关，但本实验结果依然提示对于儿童咳嗽变异性哮喘的发生，TIM-3基因启动子区－574T/G多态性仍是一个重要的易感危险因素，其构成的单体型也在CVA患儿及对照组之间存在差异。未发现CVA患儿3种基因多态性与皮肤点刺、总IgE、EOS水平有关，期待大样本多中心的研究证实TIM-3启动子区基因多态性与皮肤点刺、总IgE、EOS水平间的关系，将有助于儿童咳嗽变异性哮喘分子流行病学研究。